伏馬毒素的危害及檢測方法

伏馬菌素的信息：

伏馬菌素 (Fumonisin FB) 是一種霉菌毒素,是由串珠鐮刀菌 (Fusarium moniliforme Sheld)產(chǎn)生的水溶性代謝產(chǎn)物，是一類由不同的多氫醇和丙三羧酸組成的結(jié)構(gòu)類似的雙酯化合物。此后又從伏馬毒素中分離出伏馬毒素B1（FB1）和伏馬毒素B2（FB2）。到目前為止，發(fā)現(xiàn)的伏馬毒素有FA1、FA2、FB1、FB2、FB3、FB4、FC1、FC2、FC3、FC4和FP1共11種，分為4類即FA、FB、FC和FP，但主要分布以FB1、FB2和FB形式存在，其中FB1占總量的70%，毒性強，主要污染玉米及其制品。

伏馬毒素的危害：

1、伏馬毒素在糧食作物中的危害

伏馬毒素在自然界廣泛存在，主要由串珠鐮刀菌（Fusarium verticillioides）、層出鐮刀菌（Fusarium proliferatum ）和Fusarium nygamai等鐮刀菌屬產(chǎn)生 。目前至少有18種伏馬毒素已被分離鑒定，根據(jù)它們的化學結(jié)構(gòu)分為A族、B族、C族和P族。伏馬毒素B族，主要是FB1和FB2在自然界的存在最為廣泛，主要污染玉米及其制品。玉米中伏馬毒素污染程度與種植地理位置、農(nóng)業(yè)規(guī)范以及玉米品種有關(guān)。在氣候溫暖的玉米產(chǎn)區(qū)，常常發(fā)現(xiàn)高水平污染的伏馬毒素。伏馬毒素的污染水平也受收獲前和收獲期間的環(huán)境因素如溫度、濕度、干旱和降雨等影響。收獲后玉米的不當儲藏也會導致伏馬毒素污染水平增加。

2、伏馬毒素對人和畜噙的危害

FB1可引起馬腦白質(zhì)軟化癥、豬肺水腫綜合征和大鼠肝癌等動物疾病，對動物養(yǎng)殖業(yè)影響較大。國際癌癥研究機構(gòu)（IARC）將FB1列為對人類可能的致癌物質(zhì)，動物實驗表明：肝和腎是FB1的主要作用靶向?qū)ο螅瑑纱卧u價結(jié)果給出伏馬毒素B1、B2、B3單獨或聯(lián)合的暫定每日最大耐受攝入量（PMTDI）為2ug/kg bw/day；人類流行病學研究表明，世界各個地區(qū)玉米感染串珠鐮刀菌（伏馬毒素的主要產(chǎn)生菌）和食道癌發(fā)病的發(fā)生之間具有關(guān)聯(lián)，然而，目前尚沒有建立明確的劑量反應(yīng)關(guān)系，其毒理機制也不清楚。此外，人口統(tǒng)計、種族、遺傳易感性、文化，經(jīng)濟和營養(yǎng)狀況等地域差異也會影響食道癌發(fā)病率。

伏馬毒素在國際上和國內(nèi)標準：

伏馬毒素在世界范圍的廣泛存在，尤其對玉米影響最大。為了控制玉米中伏馬毒素的危害，一些發(fā)達國家和地區(qū)按照玉米形態(tài)和加工用途分類規(guī)定了伏馬毒素標準

1、歐盟規(guī)定：

伏馬毒素(FB1+FB2)在未加工的玉米（不包括用于濕磨法處理的未加工玉米）中為4000μg/kg；供人直接食用的玉米和玉米制品為1000μg/kg；供嬰幼兒食用的玉米食品和嬰兒食品為200μg/kg

2、美國規(guī)定：

伏馬毒素(FB1+FB2+FB3)在脫胚的干磨玉米制品（脂肪含量< 2.25%，干基重）中為2000μg/kg；脫胚的干磨玉米制品（脂肪含量≥2.25%，干基重）以及干磨玉米麩皮和用于生產(chǎn)粗玉米粉凈玉米的為4000μg/kg。

3、國際食品法典委員會(CAC)規(guī)定：

未加工的玉米為4000μg/kg，玉米粉和玉米面中為2000μg/kg ，同時制訂了相關(guān)采樣計劃規(guī)范。

4、我國對伏馬毒素的規(guī)定：

我國現(xiàn)行標準《食品安全國家標準食品中真菌毒素限》（GB2761-2017）尚未涉及伏馬菌素指標的限參照CAC及歐美發(fā)達國家標準情況，擬將我國玉米原糧中伏馬菌素限規(guī)定為4000μg/kg，玉米面（渣）中伏馬菌素限規(guī)定為2000μg/kg，含有玉米的谷物制品中伏馬菌素限規(guī)定為1000μg/kg，含有玉米的嬰幼兒谷類輔助食品中伏馬菌素限規(guī)定為200μg/kg。

我國最新GB 13078—2017《飼料衛(wèi)生標準》規(guī)定了部分飼料原料和飼料產(chǎn)品中的FB1和FB2總量的標準。其中飼料原料玉米及其加工產(chǎn)品、玉米酒糟類產(chǎn)品、玉米青貯飼料和玉米秸稈中伏馬毒素的限為 60 mg/kg，其他飼料產(chǎn)品中伏馬毒素的量在5～20 mg/kg[23]。

伏馬毒素檢測標準部分索引：

1、CAC/RCP 51-2003預(yù)防谷物中霉菌毒素污染操作規(guī)范，包括赭曲霉素A、玉米赤霉烯酮、伏馬毒素、單端孢霉烯族毒素的附錄

2、DB37/T 3856-2019飼料中黃曲霉毒素B1、嘔吐毒素、伏馬毒素B1和玉米赤霉烯酮的測定　高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

3、GB 5009.240-2016食品安全國家標準 食品中伏馬毒素的測定

4、LS/T 6130-2017糧油檢驗 糧食中伏馬毒素B1、B2的測定 超高效液相色譜法

5、LS/T 6133-2018糧油檢驗 主要谷物中16種真菌毒素的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

6、NY/T 1970-2010飼料中伏馬毒素的測定

7、SN/T 3136-2012出口花生、谷類及其制品中黃曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏馬毒素B1、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、T-2毒素、HT-2毒素的測定

8、SPGG 國家食品藥品監(jiān)督管理局食藥監(jiān)食監(jiān)三便函(2014)73號附件-2014食品中伏馬毒素的測定高效液相色譜—質(zhì)譜法

常用伏馬毒素檢測方法對比：

1、伏馬毒素膠體金快速檢測法：基于將膠體金作為示蹤標志物用于抗原抗體的免疫反應(yīng)，待檢物質(zhì)加樣至試劑卡后,在層析作用下，待檢物質(zhì)中的抗原與金標試劑的結(jié)合物發(fā)生特異性結(jié)合而被截留，聚集于檢測帶并產(chǎn)生顏色，配合讀數(shù)儀和內(nèi)置標準曲線，確定待測物質(zhì)含量。是嘔吐毒素簡便的檢測方，樣品處理簡單，五到十分鐘就可以看到檢測結(jié)果。可以根據(jù)G、T線，初步確定所測樣本嘔吐毒素含量范圍。可作為粗略判斷方法，廣泛用于樣本初步篩查,也是目前主流的檢測方式之一。

2、酶聯(lián)免疫吸附測定法：依據(jù)該方法開發(fā)出來的嘔吐毒素檢測試劑盒，可以定量的檢測樣品中嘔吐毒素的含量，目前進口及國產(chǎn)試劑盒均有大量品牌，價格適中，有國標支持，但操作比較復(fù)雜，步驟較多，對人員的操作熟練程度及環(huán)境要求較高，適合有良好質(zhì)檢實驗室的企業(yè)使用，可作為產(chǎn)品的初步質(zhì)量控制。

3、免疫親和層析柱檢測法：伏馬毒素檢測免析親和柱方案基于抗原抗體特異性可逆結(jié)合特性技術(shù)，根據(jù)抗原抗體的高特異性，從復(fù)雜的待測樣品中提取目標化合物，再結(jié)合液相色譜法及液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測技術(shù)進行定量檢測。該項技術(shù)靈敏度高，測定范圍廣泛，采用單克隆免疫技術(shù)，可以有效性地將嘔吐毒素和其他真菌毒素分離出來，分離效率和回收率高，正確性和可靠性強，有國標支持。但檢測成本高，儀器維護成本高。一般作為檢測機構(gòu)終端判定方法，也有大型企業(yè)作為產(chǎn)品質(zhì)量衛(wèi)生指標控制方法。

4、熒光定量檢測卡法：伏馬毒素熒光定量檢測技術(shù)基于免疫層析和特異性免疫反應(yīng)，針對檢測項目遴選高特異性的單克隆抗體，依托先進的熒光量子點微球標記技術(shù)，在層析作用完成特異性結(jié)合，并激發(fā)熒光強度，通過專用的熒光設(shè)備測量檢測線和質(zhì)控線的熒光強度值，結(jié)合內(nèi)置的標準曲線完成檢測過程。可以和親和柱方法相媲美，檢測價格適中，有行業(yè)標準支持，既適合實驗室檢驗使用，也能隨車攜帶，收糧現(xiàn)場使用。相較于傳統(tǒng)的膠體金檢測技術(shù)具備靈敏度高、數(shù)字穩(wěn)定等優(yōu)勢是目前主流的檢測方式

以上幾種方法各有優(yōu)缺點，理化方法最大的優(yōu)點是結(jié)果準確、法定認可，但此方法需要大型的儀器設(shè)備，設(shè)備價格昂貴，操作過程復(fù)雜、時間較長，并且沒有辦法在現(xiàn)場和基礎(chǔ)小型實驗室使用，所以不太適用于大規(guī)模樣本的篩查和日常的內(nèi)控檢測。膠體金快速檢測卡是企業(yè)常用的快速檢測方法，此類方法用于大量樣品的篩查，具有操作簡便，檢測快速，成本較低等優(yōu)點。酶聯(lián)免疫吸附測定法，但操作比較復(fù)雜，步驟較多，對人員的操作熟練程度及環(huán)境要求較高，適合有良好質(zhì)檢實驗室的企業(yè)使用

綜上所述，很多食品飼料加工企業(yè)一般都是用伏馬毒素熒光定量快速檢測法，結(jié)果快速準確、靈敏度高，數(shù)字穩(wěn)定的優(yōu)勢。是目前主流的檢測方式

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