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非洲豬瘟檢測方案
更新時間:2023-05-05
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          非洲豬瘟(英文名稱:African Swine fever,簡稱:ASF)是由非洲豬瘟病毒(英文名稱:African Swine fever virus,簡稱:ASFV)感染家豬和各種野豬(如非洲野豬、歐洲野豬等)引起一種急性、出血性、烈性傳染病。非洲豬瘟病毒是非洲豬瘟科非洲豬瘟病毒屬的重要成員,病毒有些特性類似虹彩病毒科和痘病毒科。病毒粒子的直徑為175-215納米,呈20面體對稱,有囊膜。基因組為雙股線狀DNA,大小170-190kb。在豬體內(nèi),非洲豬瘟病毒可在幾種類型的細(xì)胞漿中,尤其是網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞中復(fù)制。該病毒可在鈍緣蜱中增殖,并使其成為主要的傳播媒介。世界動物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為法定報告動物疫病,該病也是我國重點(diǎn)防范的一類動物疫情。
自2018年8月3日我國確診非洲豬瘟疫情以來,我國已經(jīng)在遼寧、安徽、黑龍江、海南等地接連爆發(fā)非洲豬瘟疫情。盡管非洲豬瘟傳入我國僅幾年的時間,但已經(jīng)在多地接連爆發(fā),造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失,而且非洲豬瘟臨床癥狀與豬瘟癥狀相似,只能依靠實(shí)驗室監(jiān)測確診。在目前的情況下,急需一種能對非洲豬瘟進(jìn)行快速檢測的方案!
項目  | 序號  | 物品名稱  | 型號規(guī)格  | 單位  | 數(shù)量  | 備注  | 
主 機(jī) 箱  | 1.  | 儀器主機(jī)  | HW-ZW16  | 臺  | 1  | |
2.  | 儀器使用說明書  | 個  | 1  | |||
3.  | 合格證/保修卡  | 本  | 2  | |||
4.  | 儀器電源線  | 根  | 1  | |||
5.  | 鋁合金箱  | 個  | 1  | |||
配 件 箱  | 6.  | 電子天平  | 0-500g  | 臺  | 1  | |
7.  | 樣品杯  | 50mL  | 個  | 24  | ||
8.  | 移液槍  | 1-5ml  | 把  | 1  | ||
9.  | 移液槍槍頭  | 1-5ml  | 包  | 1  | ||
10.  | 移液槍  | 100μL-1000μL  | 把  | 1  | ||
11.  | 移液槍槍頭  | 100μL-1000μL  | 包  | 1  | ||
12.  | 移液槍  | 10μL-100μL  | 把  | 1  | ||
13.  | 移液槍槍頭  | 10μL-100μL  | 包  | 1  | ||
14.  | 移液槍  | 2μL-20μL  | 把  | 1  | ||
15.  | 移液槍槍頭  | 2μL-20μL  | 包  | 1  | ||
16.  | 剪刀  | 把  | 1  | |||
17.  | 鑷子  | 把  | 1  | |||
18.  | 研缽  | 直徑8cm  | 個  | 1  | ||
19.  | 離心機(jī)  | 大龍D1008  | 臺  | 1  | ||
20.  | 離心管  | 1.5mL  | 個  | 50  | ||
21.  | PCR管  | 0.2mL  | 個  | 50  | ||
22.  | 非洲豬瘟病毒熒光等溫擴(kuò)增檢測試劑  | 48T/盒  | 盒  | 5  | ||
重 要 配 件  | 23.  | 漩渦混勻器  | 臺  | 1  | ||
24.  | 畜牧恒溫箱  | -10℃~65℃  | 臺  | 1  | ||
25.  | 高速冷凍離心機(jī)  | LC-LX-HR165A  | 臺  | 1  | ||
26.  | 研磨儀  | 臺  | 1  | |||
27.  | 移液器(5種型號)  | 支  | 10  | |||
28.  | 冰箱  | 臺  | 1  | 
 
儀器型號  | HW-ZW16  | 
樣品通量  | 16x0.2ml,兼容單管和8聯(lián)管  | 
加熱方式  | 半導(dǎo)體制冷片結(jié)合電性電阻熱紅外技術(shù)  | 
溫控范圍  | 室溫~85℃  | 
溫控精度  | ±0.1℃  | 
溫度均一性  | ±0.15℃  | 
激發(fā)光波長  | 第一通道:470nm±10nm  | 
檢測光波長  | 第一通道:520nm±10nm  | 
激發(fā)光  | 高亮度LED  | 
檢測器  | 新型光學(xué)檢測器,結(jié)合數(shù)字電路控制,光信號穩(wěn)定  | 
熒光傳導(dǎo)方式  | 太空專用光纖傳導(dǎo)  | 
結(jié)果判讀方式  | 根據(jù)擴(kuò)增曲線軟件自動判讀陰陽性  | 
結(jié)果顯示  | 可在機(jī)器顯示擴(kuò)增曲線及出峰時間  | 
檢測時間  | ≤40分鐘  | 
檢測試劑  | 開放式恒溫?zé)晒鈾z測試劑  | 
操作軟件  | 自帶軟件  | 
控制方式  | 觸屏控制  | 
檢測項目  | 可同時最多檢測16個項目  | 
檢測靈敏度  | 10~109拷貝/反應(yīng),且樣品間無交叉污染  | 
儀器分析功能  | 根據(jù)所檢測樣品,直接分析判定陽性或陰性;也可通過標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行絕對定量  | 
軟件設(shè)置功能  | 可選擇反應(yīng)程序;可對反應(yīng)程序進(jìn)行設(shè)置,如可設(shè)置反應(yīng)時間、可在反應(yīng)過程中修改反應(yīng)時間(縮短或延長)、可設(shè)置不同溫度,每個溫度檔位差為0.1℃;可將反應(yīng)程序保存為模板;可對不同孔進(jìn)行重命名;可設(shè)置掃描間隔時間,范圍為 18~60S,默認(rèn)間隔為 60S;可設(shè)置陰陽性判斷閾值;閾值線可上下拉動等  | 
工作環(huán)境溫度  | 18~35℃  | 
儲存溫度  | -20℃~55℃  | 
環(huán)境相對濕度  | ≤85%  | 
工作電壓  | 100~240V,50~60Hz  | 
作用與用途:用于血液、血球粉、淋巴結(jié)、脾臟、扁桃體以及豬肉產(chǎn)品中非洲豬瘟病毒核酸的檢測。
1.規(guī)格:48次/盒;
2.保存條件:-20℃保存;
3.組成:熒光等溫擴(kuò)增免提取反應(yīng)液:1100ul;Bst DNA聚合酶:75ul;陰性對照:1000ul;陽性對照:200ul;礦物油:1000ul;說明書:1份;
4.有效期:12個月;
5.本試劑盒適用于便攜式熒光定量PCR儀檢測箱及各種其他型號熒光定量PCR儀;
6.反應(yīng)體系:25ul;反應(yīng)時間:1h;報告基團(tuán):FAM;淬滅基團(tuán):None;
7.結(jié)果判定:有明確判定標(biāo)準(zhǔn),被檢樣品熒光信號有指數(shù)型增長,陽性對照Tt值≤45并出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線,陰性對照無Tt值并且無擴(kuò)增曲線即S型擴(kuò)增曲線,結(jié)果成立;被檢樣品Tt值≤45并出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線為陽性;被檢樣品無Tt值并且無典型擴(kuò)增曲線為陰性;被檢樣品Tt值在45-60之間并出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線為可疑。對于可疑結(jié)果應(yīng)重新檢測,如果樣品FAM通道仍有典型S型擴(kuò)增曲線且Tt值≤60,則判定為陽性,否則為陰性;
8.本試劑盒經(jīng)中國動物疫病預(yù)防控制中心評價,診斷敏感性100%,特異性100%;
9.該產(chǎn)品為疫控(診)【2019】74號文件中推薦的產(chǎn)品;
10. 產(chǎn)品生產(chǎn)廠家具有分子生物學(xué)類診斷制品GMP車間。